弘业新创

弘业新创抗体技术股份有限公司
依次“轻链替换”和“重链突变”
 
试验材料 1.       客户提供亲本抗体序列、抗原和相应的抗体活性检测方法。抗原的数量和运输方式需要提前沟通。
2.       根据客户需求,选择链替换策略还是随机突变策略进行抗体亲和力成。
步骤 服务内容 周期(周) 报价(RMB)
构建抗体轻链表达文库 1.       以人PBMC的cDNA为模板,克隆人源KC和LC基因。
2.       采用真核表达载体,构建和保存人源轻链【KC和LC】哺乳动物细胞表达文库【转化Top10】。
12-20周 届时询价
备注:
该步骤启动之前,至少支付此步骤的50%全款;完成项目,支付尾款。
构建亲本抗体表达载体 1.       合成基因。
2.       构建亲本抗体的真核表达载体。
轻链替换 1.       制备亲本抗体重链线性表达框。
2.       制备候选轻链线性表达框,每批次制备500个克隆,一共鉴定>5000个克隆。
3.       亲本抗体重链线性表达框分别与单克隆候选轻链线性表达框组合,转染293细胞或CHO细胞,48小时后收集表达上清。
4.       ELISA鉴定抗原结合活性,选择3-5种相对亲和力高于亲本IgG抗体的克隆的轻链克隆,确定为候选高亲和力轻链克隆。
5.       提取候选高亲和力轻链克隆的质粒,与亲本抗体重链表达质粒组合,瞬时转染293细胞或CHO细胞,验证抗体的抗原结合活性, 优选最佳轻链克隆。
构建重链突变库 1.       以亲本抗体的VH为模板, 采用易错PCR方法,引入随机突变。
2.       采用真核表达载体,构建和保存重链【HC】哺乳动物细胞表达文库【转化Top10】。
  届时询价
备注:
该步骤启动之前,至少支付此步骤的50%全款;完成项目,支付尾款。
重链突变 1.       制备最佳轻链克隆线性表达框。
2.       制备候选突变重链线性表达框,每批次制备500个克隆,一共鉴定>5000个克隆。
3.       抗体轻链线性表达框分别与单克隆候选重链线性表达框组合,转染293细胞或CHO细胞,48小时后收集表达上清。
4.       ELISA鉴定抗原结合活性,选择3-5种相对亲和力高于亲本IgG抗体的克隆的重链克隆,确定为候选高亲和力重链克隆。
5.       提取候选高亲和力重链克隆的质粒,与亲本抗体轻链表达质粒组合,瞬时转染293细胞或CHO细胞,ELISA验证抗体的抗原结合活性。
 
送货 1. 撰写报告,包括亲和力成熟的整个过程,和阳性克隆序列。
2. 提交产品,包括细菌和质粒两种形式。
3. 与客户协商后确定送货方式,如果客户要求特定的送货方式,比如,干冰运输等,费用由客户承担。

技术服务
  • Tel:010-80726906
  • E-mail:info@innovabtech.com
  • 北京市昌平区中关村生命科学园生命园路29号创新大厦C座301