弘业新创

弘业新创抗体技术股份有限公司
构建小鼠免疫Fab抗体库
 
试验材料 1.       客户提供抗原,包括必要的质控数据。
2.       抗原数量、保存方式和运输方式需要提前沟通。
3.       免疫方式和小鼠的种类和数量需要提前沟通。
步骤 服务内容 周期(周) 报价(RMB)
免疫小鼠 1. 准备3-5只健康、6-8周龄Balb/c小鼠,使用其他品系小鼠需要提前沟通。
2. 使用水溶性佐剂或者弗氏佐剂,免疫小鼠2-5次,佐剂类型和免疫方案需要提前沟通。
3. 采集小鼠血清,包被免疫原,采用ELISA方法检测效价。
4. 提交效价检测结果和免疫血清给客户,如果客户根据效价检测结果同意建库,取脾脏,-80度保存,准备建库。如果客户不同意建库,项目停止。
6-8周
询价
备注:如果采用特殊的免疫方案,经过与客户沟通后,设定方案,做询价处理。
项目启动前,支付该步骤全款。
效价合格,取脾脏;
效价不合格,终止项目,不进行后续建库步骤。
制备cDNA模板 1. 提取RNA。
2. RT-PCR制备cDNA。
3. 以Actin特异的引物PCR扩增鉴定cDNA质量。
8周
询价
备注:
该实验步骤启动之前,至少支付此步骤的50%全款;完成项目,支付尾款。
构建抗体库 1.         设计和合成抗体可变区兼并引物。
2.         如果构建全鼠Fab 抗体库,PCR扩增抗体VHCH1和VLCL或VKCK基因;如果构建鼠人嵌合Fab抗体库,PCR扩增抗体VH和VL或VK基因。
3.         如果构建全鼠Fab 抗体库,酶切、连接VLCL或VKCK基因和噬菌粒载体,电击转化TG1宿主菌,构建初级抗体库,提取初级抗体库质粒;如果构建鼠人嵌合Fab抗体库,酶切、连接VL或VK基因和噬菌粒载体,电击转化TG1宿主菌,构建轻链初级抗体库,提取轻链初级抗体库质粒。
4.         如果构建全鼠Fab 抗体库,酶切、连接VHCH1基因和轻链初级抗体库质粒,电击转化TG1宿主菌,构建Fab抗体库;如果构建鼠人嵌合Fab抗体库,酶切、连接VH基因和轻链初级抗体库质粒,电击转化TG1宿主菌,构建Fab抗体库。
5.         随机挑选20个克隆,PCR鉴定阳性率,测序和分析抗体序列。
6.         包装,>1⨯1013噬菌体颗粒/毫升。
送货 1. 撰写报告,包括建库的整个过程,和代表性的序列。
2. 提交产品,包括细菌和噬菌体两种形式的抗体库。
3. 与客户协商后确定送货方式,如果客户要求特定的送货方式,比如,干冰运输等,费用由客户承担。

  • Tel:010-80726906
  • E-mail:info@innovabtech.com
  • 北京市昌平区中关村生命科学园生命园路29号创新大厦C座301