弘业新创

弘业新创抗体技术股份有限公司
定制小鼠杂交瘤单抗
 
试验材料 1.       客户提供抗原,包括必要的质控数据。
2.       抗原数量、保存方式和运输方式需要提前沟通。
3.       免疫方式和小鼠的种类和数量需要提前沟通。
步骤 服务内容 周期(周) 报价(RMB)
制备多抗 1. 准备20-30只健康、6-8周龄Balb/c小鼠,使用其他品系小鼠需要提前沟通。
2. 使用水溶性佐剂或者弗氏佐剂,免疫2-3次。佐剂类型和免疫方案需要提前沟通。
3. 采集小鼠血清,包被免疫原,采用ELISA方法检测效价。
4. 提交效价检测结果给客户,如果血清效价合格,采血,分离抗血清;如果血清效价不合格,项目停止。
6-8周
询价
备注:
如果采用特殊的免疫方案,经过与客户沟通后,设定方案,做询价处理。
项目启动前,支付该步骤全款。
效价合格,进行融合实验;效价不合格,终止实验。
纯化多抗 1. 合并全部小鼠血清,采用Protein A/G亲和层析纯化小鼠血清多抗IgG。
2. SDS-PAGE电泳鉴定纯化抗体。
1-2周 询价
融合实验 在效价合格,客户同意后进行3-4次融合,每次融合实验:
1. 取小鼠脾细胞与小鼠骨髓瘤细胞融合。
2. 有限稀释融合细胞, 96 孔板克隆化【铺10-20块板】。
3. HAT 选择杂交瘤细胞。
4. 包被免疫原,进行ELISA检测,检测出 1-100 个抗原阳性IgG分泌细胞。
5. 挑取阳性克隆,微量-80度冻存细胞【冻存细胞可保存1年以上】。
6. 每株阳性克隆提供100ul--1ml杂交瘤细胞上清,供客户进行检测。
7. 客户根据HIAT或自己的ELISA检测结果,挑选1-10株阳性克隆。
8. HIAT复苏、扩增和冻存客户确定1-10株阳性克隆,丢弃其余克隆。如果客户需要保存其余克隆,需要提前沟通,另行约定费用和保存方式。
每次融合3-4周
询价
备注:
融合实验启动前,至少支付该步骤50%预付款;如筛选到>3株包被免疫原ELISA检测阳性克隆,无论是否做细胞亚克隆,支付该步骤尾款。
亚克隆 根据客户的要求,选取3-5个阳性克隆进行亚克隆,每个克隆:
1.       做2次以上96孔板有限稀释培养。
2.       ELISA挑选3-5个亚克隆细胞株。
3.       放大至T-25 Flask培养,ELISA再次检测。
4.       常规冻存细胞,每个亚克隆冻存3管细胞。
4-8周
报告与送货 1.       免疫前血清(20μl/只)。
2.       多抗血清(>1.0ml/只)或纯化的鼠血清多抗IgG。
3.       提供实验报告,包括免疫流程、效价测定结果、 细胞融合和细胞亚克隆过程ELISA检测结果,和纯化鼠血清抗体的SDS-PAGE电泳结果。
4.       与客户协商后确定送货方式,物流费用由客户承担。免费重复送货1次。2次以上另行计费。
 
技术服务
  • Tel:010-80726906
  • E-mail:info@innovabtech.com
  • 北京市昌平区中关村生命科学园生命园路29号创新大厦C座301